Método de concentración por sedimentación
INTRODUCCIÓN
Esta técnica forma parte de una serie de análisis coproparasitoscopicos considerados reconcentración fue descrita por Ritchie en 1948, es de utilidad para la búsqueda de huevos, quistes y larvas. Es empleada cuando no se observan parásitos en el método directo y para aumentar la probabilidad de observar parásitos en las muestras estudiadas.
Algunas referencias no indican el uso de malla o gasa al aplicar el método (verapartado de técnica) por lo que se pueden obtener sedimentos sucios y no con localidad requerida para una óptima observación.
Fundamento: se basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.
Unas ventajas que tiene este método es concentrar y no forma las formas parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser examinada, se usa cuando se necesita una técnica para evaluar de tratamiento y determinación de frecuencia.
REACTIVOS Solución salina isotónica Solución de formaldehído al 10% Éter |
MATERIAL Y EQUIPO
Microscopio
Centrífuga
Tubos de ensaye cónicos de 15 ml
Vasos de precipitado de 50 ml
Aplicadores de madera
Pipetas Pasteur con bulbo
Cubreobjetos
Portaobjetos
METODO
1.- Con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr. de la materia fecal en el vaso de precipitado, se añaden 10 ml de solución salina y se homogeniza.
2.-Se filtra la suspensión a través de la gasa colocada en el embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cónico.
3.-Se centrífuga la suspensión durante 2 min a 2000 rpm.
4.- Se decanta el sobrenadante y se resuspende el sedimento con solución salina, centrifugando, decantando y resuspendiendo dos veces.
5.- Al último sedimento se agregan 10 ml de solución de formaldehido al 5%, se mezcla y se deja reposar durante 10 min.
6.- Se añaden después 0.5 ml de éter, se tapan los tubos con tapones de caucho y se agitan enérgicamente durante 30 segundos.
7.- Se centrífuga durante 2 minutos a 2000 rpm.
8.- Después de centrifugar se observan 4 capas
a) éter en la superficial,
b) un tapón de restos fecales,
c) formaldehido,
d) sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios.
Se decanta el sobrenadante
9.- Se introduce la pipeta Pasteur hasta el sedimento sacamos una gota de sedimento y lo colocamos en un portaobjetos.
10.-Se le añade una gota de lugol y con uno de los ángulos del cubreobjetos, se homogeniza, cubriéndolo con el mismo.
Al final observamos al microscopio con el objetivo 10X Y 40X las muestras.
OBSERVACIONES:
En esta práctica pudimos observar si había la presencia de quistes, pudimos practicar las otras prácticas que ya habíamos hecho y conocimos un nuevo material que fue el tubo de ensaye cónico.
Fuentes de Información:
Esta práctica se realizó el día 18 de Septiembre del 2011
EVIDENCIAS
EVIDENCIAS
MUY BIEN STEPHY!!!
ResponderEliminarSolo hay que cuidar un poco la ortografía, en generla esta bien, te felicito, el esfuerzo bien vale la pena, lo que cuesta se valora más.
Saludos